流式細(xì)胞術(shù)

?

?????? 流式細(xì)胞術(shù)生物分析技術(shù)的突出特點(diǎn)是在單個(gè)細(xì)胞水平進(jìn)行測(cè)定，可在同一細(xì)胞內(nèi)同時(shí)檢測(cè)兩種或更多種細(xì)胞因子，可根據(jù)細(xì)胞免疫表型區(qū)分不同的細(xì)胞亞群，進(jìn)行多參數(shù)相關(guān)分析。

?????? 與傳統(tǒng)的熒光鏡檢相比，流式細(xì)胞術(shù)具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn)，可以高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù)，成為當(dāng)代先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。目前流式細(xì)胞術(shù)儀器和方法的日臻完善，它的應(yīng)用范圍也日益廣泛，現(xiàn)已普遍用于免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和生物化學(xué)等臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。

?????? 隨著單克隆抗體的發(fā)展，以及流式細(xì)胞儀檢測(cè)方法的不斷完善，采用流式細(xì)胞術(shù)不但可以對(duì)細(xì)胞表面的抗原和受體進(jìn)行分析，對(duì)細(xì)胞內(nèi)的抗原或分子也可以進(jìn)行檢測(cè)?，F(xiàn)在細(xì)胞微球試驗(yàn)(CBA)技術(shù)的出現(xiàn)，使得流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)血清、血漿、培養(yǎng)液上清或其他體液中可溶性蛋白和細(xì)胞因子.

?

Bio-Plex 生物分析技術(shù)

?

????? Bio-Plex懸液芯片系統(tǒng)將先進(jìn)的軟件包、系統(tǒng)檢驗(yàn)工具、微球耦聯(lián)試劑和即用型細(xì)胞因子與磷酸化蛋白測(cè)試試劑整合在一起，使硬件、軟件和檢測(cè)試劑形成一個(gè)功能強(qiáng)大的芯片技術(shù)平臺(tái)，大大提高了結(jié)果的精確性和可重復(fù)性，使用更加簡(jiǎn)便高效。該系統(tǒng)為蛋白與核酸研究人員提供了靈活的復(fù)合測(cè)試方案，可在單個(gè)樣品中同時(shí)分析多達(dá)100個(gè)生物分子。利用100種不同顏色微球（xMAP技術(shù)）標(biāo)記生物分子配體，每個(gè)微球可耦聯(lián)一個(gè)對(duì)應(yīng)不同靶分子的特異反應(yīng)物。

?

免疫生物分析技術(shù)

?

?????? 細(xì)胞因子均為蛋白或多肽，具有較強(qiáng)的抗原性。隨著重組細(xì)胞因子的出現(xiàn)，可較方便地獲得細(xì)胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體，因此可利用抗原抗體特異性反應(yīng)的特性，用免疫學(xué)技術(shù)定量檢測(cè)細(xì)胞因子，常用的方法包括ELISA、RIA及Western Blot 免疫印跡法。

?

?????? 盡管細(xì)胞因子種類(lèi)繁多，只要獲得了針對(duì)某一因子的特異性抗體（包括多克隆抗體或單克隆抗體）均可采用相似的技術(shù)開(kāi)展工作。免疫學(xué)檢測(cè)法可直接測(cè)定樣品中特定細(xì)胞因子的含量（用ng/ml表示），為大規(guī)模檢測(cè)臨床病人血清中細(xì)胞因子的含量提供了方便。本法僅測(cè)定細(xì)胞因子的抗原性，與該因子活性不一定相平行，因此要了解細(xì)胞因子的生物學(xué)效應(yīng)，必須結(jié)合生物學(xué)檢測(cè)法。

?????? 使用不同的生物分析技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞因子檢測(cè)，可能結(jié)果有些差異，且不同的檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)室條件進(jìn)行選擇。在進(jìn)行細(xì)胞因子檢測(cè)時(shí)，應(yīng)考慮到細(xì)胞因子的作用具有網(wǎng)絡(luò)性的特點(diǎn)，需明確檢測(cè)方法所測(cè)定的細(xì)胞因子成分，并考慮其抑制劑和可溶性受體的水平，將各種結(jié)合使用，有可能得到較為可靠的結(jié)果。

?