設(shè)計(jì)更好的T細(xì)胞

       在用作臨床治療之前，CAR-T細(xì)胞是在實(shí)驗(yàn)室里研制的。從患者身上分離出來(lái)原代人T細(xì)胞，進(jìn)行激活、擴(kuò)增和遺傳修飾，以表達(dá)體外識(shí)別所選抗原的CARs。在這個(gè)階段，有許多因素需要加以考慮，其中包括靶點(diǎn)選擇和遺傳修飾的方法。

1、靶點(diǎn)選擇

       CARs是合成的跨膜受體，其含有賦予抗原特異性的抗體的胞外scFv結(jié)構(gòu)域，和一種細(xì)胞內(nèi)組分，這種細(xì)胞內(nèi)組分通常包括CD3ζ和協(xié)同刺激（比如CD28、4-1BB、OX-40）信號(hào)域，以模擬T細(xì)胞信號(hào)（圖1）。在抗原識(shí)別后，CAR-T細(xì)胞被激活并啟動(dòng)它們的效應(yīng)子功能，比如細(xì)胞因子的產(chǎn)生和細(xì)胞毒性，其最終導(dǎo)致任何表達(dá)靶點(diǎn)抗原細(xì)胞的消除。由于腫瘤抗原通常也在非惡性細(xì)胞上表達(dá)，因此，靶點(diǎn)選擇在CAR-T細(xì)胞設(shè)計(jì)是一項(xiàng)挑戰(zhàn)。

       最基本的CAR-T細(xì)胞能靶向單一的腫瘤特異性抗原從而用于血癌治療。比如靶向在B細(xì)胞淋巴瘤和淋巴細(xì)胞白血病上表達(dá)的CD19的工程化T細(xì)胞，以及靶向在急性髓系白血?。ˋML）和其他血液系統(tǒng)惡性腫瘤上過(guò)度表達(dá)的CD123（IL3RA）的工程化T細(xì)胞。

2、遺傳修飾

     通過(guò)對(duì)T細(xì)胞遺傳修飾表達(dá)CAR，其被重新定向至一特定的靶點(diǎn)。最常用的遺傳修飾T細(xì)胞的方法是使用病毒（比如γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒）的載體，這些工程化載體可以攜帶CAR構(gòu)建體。簡(jiǎn)言之，T細(xì)胞被激活，然后用可將其攜帶的物質(zhì)釋放進(jìn)細(xì)胞的病毒顆粒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而導(dǎo)致CAR構(gòu)建體插入轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞基因組里（圖2）。

3、新概念

      CAR-T細(xì)胞設(shè)計(jì)的前沿研究中不斷有各種令人興奮的新概念提出。特別令人感興趣的是遞送：如何有效地將T細(xì)胞遞送到腫瘤中，以及工程化的T細(xì)胞能夠在體內(nèi)傳送些什么物質(zhì)給腫瘤。
       這些新的概念可以改進(jìn)治療效果，但有些也可能增加治療成本。由于T細(xì)胞療法已經(jīng)成本過(guò)高，因此需要進(jìn)行各項(xiàng)臨床試驗(yàn)來(lái)確定將這些新概念從實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用到臨床是否有意義。