產(chǎn)品應(yīng)用
本試劑盒的引物序列特異性地針對(duì)支原體基因組中高度保守的的16S rRNA編碼區(qū),可檢測(cè)包括六種細(xì)胞污染常見(jiàn)的支原體在內(nèi)的全部種屬的支原體,真核生物和細(xì)菌的DNA都不會(huì)被本試劑盒擴(kuò)增。

- 檢測(cè)方法:傳統(tǒng)PCR
- 儲(chǔ)存:-20℃
- 運(yùn)輸 :藍(lán)冰
- 檢測(cè)限:100fg-10fg/反應(yīng)
- PCR反應(yīng)時(shí)長(zhǎng):1小時(shí)10分鐘
- 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):N/A
常見(jiàn)問(wèn)題釋疑
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支原體污染對(duì)實(shí)驗(yàn)有哪些影響?
支原體污染后不會(huì)立即造成細(xì)胞死亡,但會(huì)隨著支原體的不斷生長(zhǎng)使細(xì)胞發(fā)生一系列生理改變,例如干擾核酸合成,改變新陳代謝等,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在具體的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中,還會(huì)影響質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率,抑制病毒增殖。
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疑似支原體污染怎么判斷?
細(xì)菌和真菌造成的污染相對(duì)比較容易檢測(cè),支原體造成的污染卻很難察覺(jué),即使生長(zhǎng)密度高達(dá)10E7-10E9 CFU/mL,也沒(méi)有污染跡象,如渾濁、pH變化等。如果細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢、狀態(tài)變差的情況,在排除其他原因的條件下,細(xì)胞狀態(tài)仍然不見(jiàn)好轉(zhuǎn),可以考慮是受到支原體污染。
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實(shí)驗(yàn)室支原體污染的原因有哪些?
細(xì)胞之間的交叉污染;
工作環(huán)境或者實(shí)驗(yàn)器材的污染;
實(shí)驗(yàn)者無(wú)菌操作不佳;
污染的培養(yǎng)基或者試劑;
帶有支原體污染的原始組織材料。
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預(yù)防支原體污染的實(shí)驗(yàn)室管理措施有哪些?
新引進(jìn)或者原代分離的細(xì)胞需要進(jìn)行支原體檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果為陰性方可繼續(xù)培養(yǎng);
穿戴細(xì)胞房專用衣帽和鞋套,及時(shí)處理廢棄物、移液管、廢液皿等;
一旦發(fā)現(xiàn)已污染支原體的細(xì)胞,要及時(shí)處理,避免支原體更大范圍的散播。